【2012年7月4日，独立日......没想到独立日我都得上班......
算了，不说这些，言归正传，这次实验有些难度，需要建立的是大鼠肺部感染模型，用的是甲方实验室给的铜绿假单胞菌......（1）
唉，他们还真会挑项目，铜绿的肺部感染可不好做啊。
咳咳~~
为了最大可能地模拟肺部感染的发病过程，我应该会使用锐孔喷射。先将铜绿假单胞菌的一种混悬液制成包裹体凝胶小珠，然后再接种至大鼠的肺部，建立大鼠肺部感染模型，最后通过细菌学和病理学指标来评价模型建立的成功与否。】
耳麦里男人说话的声音突然被短促的“咔嚓”声关停，然后遍布在世界各地的13位传染病学专家耳边响起了西弗的旁白：“这是得州圣安东尼奥一家生物实验室的研究员在7月初做的一个外包实验，刚才放的是他做实验时的录音。”
“发展似乎和之前的一样？”
“对，几乎一模一样。”西弗重重地叹了口气，“现在圣安东尼奥也出现了严重感染的情况，从刚得到的消息来看，肺部感染几率比WDC的高了整整一大截。”
“我记得原来不到40%吧。”
“现在已经超过了70%。”
“耐药性怎么样？”
“全耐药占了将近40%，比金葡菌还要难缠。”
“别说全耐药了，就算只是部分耐药的铜绿假单胞菌，它造成的肺部感染也是相当棘手的东西......”
原本这次远程视频会议主要讨论的是金葡菌，但没想到铜绿假单胞菌却在米国的西南角搞了个大动作。这些专家教授很清楚，细菌虽然不比病毒，有抗生素做对抗，但如果养出个超级耐药菌株，那来什么抗生素都于事无补。
尤其是耐药菌株里的常客，铜绿。（2）
“大家都听听实验经过吧，在带了口罩，做足基本防护的情况下，我也看不出是哪儿出了问题。”
【选取健康清洁级大鼠200只，体重大约在180-220g之间，7周龄，雌雄各半。计算机随机号法随机分为2组，分别为感染组，无菌藻酸盐对照组，数量各半。置无菌实验房内，分笼饲养，自由取食。
选用藻酸盐粉末溶解在0.9%NaCl中，维持浓度为11mgml，高压灭菌，置于4℃冰箱中备用。
这次实验，甲方提供的铜绿假单胞菌依然是最常用的PAO1菌株，送来之前一直在M-H琼脂(含20%甘油)中-70℃冻存。我在拿到手后，做了菌株复苏，将它接种至37℃孵箱里的M-H琼脂上，先行孵育18h，待见到绿色PAO1菌落生长，便可以使用了。（3）
呵呵，这次菌落生长还挺快的，其实10h基本就能见到绿色菌落了......】
西弗又一次掐掉了录音，问道：“大家对这种高速生长的铜绿假单胞菌有什么想法么？”
“......嗯，10h确实快了些，但也不是没可能。”
“我个人觉得整个实验都是有预谋的，如此快速生长必不可能是PAO1野生型！”
“甲方机构的地址是存在的，但这个地址上却没有什么生物实验室，而是......”西弗欲言又止，“算了，这个没什么好说的，反正我们这里已经在查了。”
“上次做的金葡菌实验有没有菌种的详细报告？”
“实验菌种已经销毁，找不到了。”西弗叹了口气说道，“其实就算找到了鉴定报告也没什么用，很大概率是假的。”
“用这种做过手脚的变异菌株，实在用心险恶啊。”
“先是WDC，又是得州，下一个会是哪儿？”
讨论到了现在，话题早已经偏了方向，参与会议讨论yi情的他们反而更关心米国有没有遭到shenghua袭击。但西弗并不想关心这个，有还是没有，根本不用他去操心，也不是他能定义的。
现在他想要的就是分析这两种细菌，找到对付的办法：“你们能不能讨论在点子上？说这些有什么用？”
“好了好了，不说这些了。”远在英国的教授A打起了圆场，“还是先听录音吧，先让我们把录音听完，然后再好好分析分析......”
【取出经过18h复苏的细菌培养物1ml，与9ml无菌藻酸盐溶液混合，调节菌落最终浓度为3麦氏单位(浓度约9×10^8CFUml)。(见下一章1)
将具有一定黏性的混悬液放入锐孔喷射器的容器中，接入压缩空气形成藻酸盐飞滴，飞滴进入氯化钙缓冲液成为直径60～100μm的小珠子。
将藻酸盐珠在钙浴中持续搅动1h后离心，弃上清液，将沉淀小珠重新悬浮于氯化钙缓冲液中，调节菌液浓度约为5×10^8CFUml，置于4℃冰箱备用。
对照组使用同样的方法和步骤制作无菌小珠，内容物为无菌生理盐水，以代替细菌悬液......】
西弗忽然问道：“怎么样？”
“我觉得除了那个10h就复苏之外，没什么问题。”
“我也这么觉得，整个制备过程还是挺合规矩的。”
“也没什么合不合规矩，就是简单的准备工作。如果没做好个人防护，那也说明不了什么问题。”
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